ОБЩИЕ ЗАКОНОМЕРНОСТИ МЕТАБОЛИЧЕСКИХ РАССТРОЙСТВ ПРИ ГИПОКСИИ РАЗЛИЧНОГО ГЕНЕЗА И ПАТОГЕНЕТИЧЕСКОЕ ОБОСНОВАНИЕ ПРИНЦИПОВ ИХ МЕДИКАМЕНТОЗНОЙ КОРРЕКЦИИ
14.00.16 – Патологическая физиология
Автореферат
диссертации на соискание ученой степени
кандидата медицинских наук
Саратов 2008
Работа выполнена на кафедре патологической физиологии в Государственном образовательном учреждении высшего профессионального образования «Саратовский государственный медицинский университет Федерального агентства по здравоохранению и социальному развитию».
Научный руководитель:
доктор медицинских наук, профессор Чеснокова Нина Павловна.
Официальные оппоненты:
Ведущая организация:
Защита диссертации состоится «___»________2008 года в ____ часов на заседании диссертационного совета Д 208.094.03 при ГОУ ВПО «Саратовский ГМУ Росздрава» по адресу: 410012, г. Саратов, ул. Большая Казачья, 112.
С диссертацией можно ознакомиться в библиотеке ГОУ ВПО «Саратовский ГМУ Росздрава».
Автореферат разослан «___»__________ 2008г.
Ученые секретарь диссертационного совета,
доктор медицинских наук Кодочигова А.И.
ОБЩАЯ ХАРАКТЕРИСТИКА РАБОТЫ
Актуальность проблемы
Как известно, гипоксические состояния осложняют течение многих заболеваний различного генеза, являясь важнейшей составляющей самых разнообразных нозологических форм патологии, включающих такие типовые патологические процессы, как воспаление, лихорадка, шок ДВС – синдром и др. (Чазов Е.И., 1992; Шевченко Ю.Л., 2000; Ливанов Г.А. и соавт., 2002; Окороков А.И., 2003, 2004; Беленков Ю.Н., Оганов Р.Г., 2007; Янковская Л.В., Зинчук В.В., Лис М.А., 2007).
Несмотря на очевидные различия в пусковых механизмах формирования гипоксии экзогенного или эндогенного происхождения метаболические сдвиги в условиях дефицита кислорода в биологических системах в значительной мере стереотипны (Шепелев А.П. и соавт., 2000; Ляхович В.В. и соавт., 2005; Шулутко Б.И., Макаренко С.В., 2005; Шевченко Н.М., 2006; Balaban R.S., 2006; Espey M.G., 2006; Vo T.D., Palsson B.O., 2007). Последние, как известно, характеризуются активацией процессов гликолиза, липолиза, протеолиза, развитием метаболического или респираторного ацидоза, набуханием митохондрий и соответственно разобщением окислительного фосфорилирования и свободного дыхания, дефицитом АТФ, подавлением энергозависимых реакций в клетках различной структурной и функциональной организации (Миловский В.Г. и соавт., 1992; Воложин А.И., Порядин Г.Н., 2000; Реброва Т.Ю. и соавт., 2007; Deem S., 2006; Lambert I.H. et al., 2006; Madamanchi N.R., Runge M.S., 2007).
Среди механизмов, приводящих к повреждению биологических мембран клеток, дезинтеграции различных биосистем в условиях гипоксии, необходимо выделить, прежде всего, активацию свободнорадикального окисления липидов, белков, нуклеиновых кислот (Николаев С.М. и соавт. 1997; Зайцев В.Г., Закревский В.И., 1998; Лапкин В.З. и соавт. 2001; Голиков А.П. и соавт, 2003; Luczaj W, Skrzydlewska E., 2006; Stadtman E.R., 2006; Yoshida Y, Niki E., 2006).
В связи со сложностью механизмов нарушений метаболизма, а соответственно структуры и функции клеток в различных органах и тканях при гипоксических состояниях различного генеза, очевидны и чрезвычайные трудности медикаментозной коррекции сдвигов метаболического статуса в условиях гипоксии (Чазов Е.И., 2000; Виноградов В.М., Криворучко Б.И., 2001; Ливанов Г.А. и соавт., 2002, 2005; Ly J.V. et al., 2006; Tappia P.S. et al., 2006).
Обращает на себя внимание тот факт, что до настоящего момента не проводилась сравнительная оценка характера метаболических сдвигов в миокарде и структурах головного мозга при различных видах системной и локальной гипоксии, не установлена патогенетическая взаимосвязь активации процессов липопероксидации – одного из эфферентных звеньев развития гипоксии с характером энергетического обеспечения клеток различных органов и тканей (Максименко А.В., 1993; Косолапов В.А. и соавт., 1994; Костюченко А.П., 1998; Chang C.Y. et al., 2006;). В связи с этим очевидно, что, несмотря на широкие возможности применения разнообразных по месту приложения действия антиоксидантов и антигипоксантов, до настоящего момента отсутствует систематизация данных относительно патогенетического обоснования эффективности и целесообразности экстренного применения тех или иных способов медикаментозной коррекции расстройств метаболизма в структурах миокарда и головного мозга при острой гипоксии различного генеза (Коваленко А.Л., Белякова Н.В., 2000; Бульон В.В. и соавт., 2002; Зарубина И.В., 2002; Коровина Н.А., Рууге Э.К., 2002; Murakami A, Ohigashi H., 2006; Wassmann S. et al., 2006). Последнее определило цель и задачи данного диссертационного исследования.
Цель работы - изучить общие закономерности и особенности метаболических расстройств при острой гипоксической и циркуляторной гипоксии, патогенетически обосновать эффективность применения субстратных и регуляторных антигипоксантов, антиоксидантов при локальной ишемии миокарда и структур головного мозга, а также при системной циркуляторной и гипоксической гипоксии.
Задачи исследования
Провести сравнительную оценку системных и локальных метаболических сдвигов при гипоксической и циркуляторной гипоксии экзогенного происхождения, а также при локальной циркуляторной гипоксии эндогенного происхождения.
Исследовать состояние процессов липопероксидации и активности антиоксидантной системы крови и гомогенатов головного мозга мышей при острой системной экзогенной гипоксической гипоксии. Установить патогенетическую взаимосвязь между степенью накопления продуктов липопероксидации в крови и гомогенатах мозга, а также продолжительностью жизни экспериментальных животных в условиях острой экзогенной гипоксической гипоксии, выявить возможности медикаментозной коррекции метаболических расстройств и сроков увеличения продолжительности жизни экспериментальных животных.
Установить закономерности вторичных неспецифических расстройств при экспериментальной системной циркуляторной гипоксии на модели эндотоксинового шока, сопоставить состояние процессов липопероксидации и антирадикальной защиты клеток при системной гипоксической и циркуляторной гипоксии, выявить возможности медикаментозной коррекции метаболического статуса при циркуляторной гипоксии.
Провести сравнительную оценку интенсивности процессов липопероксидации, активности антиоксидантной системы в гомогенатах ишемизированного мозга в условиях острой локальной гипоксии и реперфузии мозга по общепринятым показателям содержания промежуточных и конечных продуктов перекисного окисления липидов, активности ферментного и неферментного звеньев антиоксидантной системы. Установить взаимосвязь недостаточности антирадикальной защиты тканей головного мозга и их энергообеспечения, а также возможности медикаментозной коррекции метаболического статуса.
Изучить состояние процессов липопероксидации, активности антиоксидантной системы миокарда и характер его энергообеспечения в динамике острой локальной ишемии и сопоставить их с системными метаболическими сдвигами по интегративным показателям содержания в крови промежуточных и конечных продуктов перекисного окисления липидов, активности антиоксидантной системы.
Патогенетически обосновать возможности медикаментозной коррекции интенсификации процессов липопероксидации, недостаточности антирадикальной защиты клеток крови и миокардиоцитов, а также их энергообеспечения при острой локальной ишемии миокарда с использованием антигипоксантов и макроэргических соединений.
На основе изучения патогенеза метаболических расстройств и выявления общих закономерностей активации процессов липопероксидации, недостаточности антирадикальной защиты клеток при острой локальной и системной гипоксии различного генеза выявить наиболее чувствительные диагностические и прогностические критерии тяжести вторичных неспецифических метаболических расстройств при гипоксических состояниях, оценки эффективности использования антиоксидантов, антигипоксантов.
Научная новизна
Впервые проведена сравнительная оценка состояния процессов липопероксидации, активности антиоксидантной системы крови, а также тканей миокарда и головного мозга и их энергообеспечения в условиях локальной ишемии и системной гипоксии. Установлены общие закономерности и особенности метаболических сдвигов в указанных структурах, дано патогенетическое обоснование эффективности применения антиоксидантов, антигипоксантов субстратного и регуляторного действия при гипоксических состояниях.
В экспериментах на белых крысах обнаружено, что активация липопероксидации является типовым процессом дезинтеграции структур миокарда и головного мозга на фоне развития острой локальной циркуляторной гипоксии, а также в процессе реперфузии ишемизированных структур головного мозга. Аналогичная закономерность интенсификации свободнорадикальных процессов выявлена в экспериментах с моделированием острой системной гипоксической и циркуляторной гипоксии на животных другой видовой принадлежности – белых мышах.
Активация процессов липопероксидации коррелирует с нарушением энергообеспечения и подавлением энергозависимых процессов в ишемизированном миокарде и головном мозге, а также в процессе реперфузии структур головного мозга.
К особенностям нарушения энергообеспечения миокарда в условиях острой ишемии относится подавление активности сукцинатдегидрогеназы (СДГ), опережающее во времени подавление активности лактатдегидрогеназы (ЛДГ). Активность СДГ остается стабильно сниженной в течение трех суток развития острой ишемии миокарда.
Избыточное потребление лактата в период острой ишемии миокарда приводит к конкурентному вытеснению из метаболизма миокардиоцитов жирных кислот и соответственно накоплению малоната – трехуглеродного субстрата синтеза жирных кислот. Последний в свою очередь является основным ингибитором СДГ.
Активация гликолиза и подавление активности СДГ, коррелирующие с избыточным накоплением в гомогенатах мозга продуктов липопероксидации, обнаружены и в ткани ишемизированного головного мозга. В процессе реперфузии ишемизированного мозга (спустя 1е сутки) возникает прогрессирующая активация липопероксидации, дефицит антирадикальной защиты структур мозга, активация гликолитических и подавление аэробных реакций. Спустя 3 суток с момента реперфузии ишемизированного мозга еще более снижается антирадикальная защита клеток мозга, на что указывает падение уровня восстановленного глутатиона, несмотря на нормализацию активности СОД.
Таким образом, активация процессов липопероксидации является ведущим фактором дезинтеграции структур и функций миокардиоцитов, клеток головного мозга, крови в условиях гипоксии различного генеза, а также в процессе развития реперфузии ишемизированных тканей мозга.
Практическая значимость работы
Установление общих закономерностей активации процессов липопероксидации и недостаточности антиоксидантной системы крови, тканей миокарда и коры головного мозга при острых гипоксических состояниях различного генеза позволяет рекомендовать в качестве объективных критериев оценки тяжести метаболических нарушений и эффективности коррегирующей терапии определение содержания в крови промежуточных и конечных продуктов липопероксидации: диеновых конъюгатов и малонового диальдегида, а также показателей антирадикальной защиты клеток – активности супероксиддисмутазы, каталазы, уровня восстановленного глутатиона.
На основании экспериментальных исследований патогенетически обоснована целесообразность и эффективность применения при острых системных гипоксических состояниях антиоксидантов и антигипоксантов субстратного и регуляторного действия, в частности, цитофлавина, оксибутирата натрия, реамберина и др.
Подавление чрезмерной активации процессов перекисного окисления липидов и реактивация ферментного звена антиоксидантной системы, энергообеспечения ишемизированного миокарда позволяют рекомендовать использование цитофлавина в комплексной терапии ишемического поражения миокарда.
Макроэргические соединения – АТФ и креатинфосфат могут использоваться не только в качестве высокоэнергетических источников, но и как антигипоксанты.
По материалам исследований издано учебное пособие для врачей «Свободно-радикальные процессы и воспаление (патогенетические, клинические и терапевтические аспекты)», которое рассмотрено и утверждено Учебно-Методическим Объединением по медицинскому и фармацевтическому образованию ВУЗов России и рекомендовано к использованию в качестве учебного пособия (решение заседания проблемной учебно-методической комиссии по инфекционным болезням от 4.06.2007).
Положения, выносимые на защиту
В различных вариантах моделирования острой гипоксии на животных разной видовой принадлежности: при локальной ишемии структур миокарда и головного мозга, системной гипоксической и циркуляторной гипоксии установлены общие закономерности метаболических сдвигов в виде активации процессов липопероксидации, недостаточности ферментного и неферментного звеньев антиоксидантной системы крови, а также тканей миокарда, коры головного мозга.
В экспериментах на белых мышах, спустя 30 мин с момента развития острой системной гипоксической гипоксии экзогенного характера, обнаружены активация процессов липопероксидации и недостаточность антиоксидантной системы крови, гомогенатов головного мозга, которые носят обратимый характер и могут быть депотенцированы при использовании антиоксидантов – оксибутирата натрия, цитофлавина, реамберина. Метаболические эффекты в гомогенатах коры головного мозга при использовании оксибутирата натрия более выражены по сравнению с влиянием цитофлавина. Системные метаболические сдвиги при острой экзогенной гипоксической гипоксии обратимы: оптимальный эффект достигнут при использовании цитофлавина, реамберина.
В динамике системной циркуляторной гипоксии на модели эндотоксинового шока обнаружены одномоментное возрастание уровня промежуточных и конечных продуктов липопероксидации в крови и гомогенатах миокарда, недостаточность ферментного звена антиоксидантной системы, антирадикальной защиты клеток крови и миокардиоцитов, а также увеличение содержания в крови МСМ. Достигнуты положительные метаболические эффекты при использовании цитофлавина.
В опытах на белых крысах с экспериментальной ишемией головного мозга, достигаемой частичным ограничением мозгового кровотока, обнаружены интенсификация процессов липопероксидации, недостаточность уровня восстановленного глутатиона, коррелирующие с усилением гликолиза и подавлением активности сукцинатдегидрогеназы – одного из важнейших ферментов цикла Кребса. Спустя сутки с момента реперфузии ишемизированного мозга не выявлено нормализации энергообеспечения и интенсивности свободнорадикального окисления в гомогенатах мозга. Спустя 3 суток с момента реперфузии мозга отмечена дальнейшая активация процессов липопероксидации на фоне истощения системы антирадикальной защиты клеток.
Выявлена возможность депотенцирования метаболических расстройств в гомогенатах головного мозга при локальной ишемии мозга, а также в динамике развития реперфузионного синдрома при использовании пирацетама и цитофлавина. Эффекты цитофлавина на интенсивность гликолитических реакций в указанной модели эксперимента были более выражены по сравнению с влиянием пирацетама.
В динамике острой ишемии миокарда отмечено одномоментное увеличение содержания продуктов липопероксидации и снижение уровня восстановленного глутатиона в гомогенатах миокарда и сыворотке крови, коррелирующие с подавлением активности супероксиддисмутазы гомогенатов миокарда. Активность ферментного звена антиоксидантной системы крови претерпевает фазные изменения. На ранней стадии ишемии возникает активация супероксиддисмутазы и каталазы сыворотки крови, как одного из проявлений синдрома цитолиза, сменяющаяся подавлением этих ферментов на более поздних стадиях ишемии. Установлена патогенетическая взаимосвязь активации свободнорадикального окисления в ишемизированном миокарде с прогрессирующим снижением содержания АТФ, креатинфосфата, подавлением активности сукцинатдегидрогеназы и лактатдегидрогеназы гомогенатов миокарда.
Обнаружена принципиальная возможность коррекции процессов липопероксидации и нарушений энергообеспечения при экспериментальной острой ишемии миокарда на фоне использования неотона и цитофлавина. Причем, цитофлавин обеспечивает противоишемический эффект за счет активации сукцинатдегидрогеназного окисления, окислительно-восстановительных процессов, поскольку один из компонентов цитофлавина - никотинамид является простетической группой ферментов - кодегидрогеназы I (НАД) и кодегидрогеназы II (НАДФ), в то время, как неотон, является не только донатором макроэргических связей, но и одновременно активизирует лактатдегидрогеназу и сукцинатдегидрогеназу.
Апробация работы и внедрение в практику ее результаты
Материалы работы доложены или представлены на 65-й юбилейной научно-практической конференции студентов и молодых специалистов СГМУ «Молодые ученые – здравоохранению региона» (Саратов, 2004); научной конференции с международным участием «Медицинские, социальные и экономические проблемы сохранения здоровья населения» (Турция, г. Анталия, 2004); 3-й осенней научно-практической конференции «Молодежь и наука: итоги и перспективы» (Саратов, 2005); научной конференции с международным участием, секция «Молодых ученых и студентов» (Египет, г. Хургада, 2006), 67-й весенней научно-практической конференции студентов и молодых специалистов СГМУ «Молодые ученые – здравоохранению региона» (Саратов, 2006), конференции с международным участием «Климат и окружающая среда» (Амстердам, 2006), межрегиональной научно-практической конференции студентов и молодых ученых с международным участием «Молодежь и наука: итоги и перспективы» (Саратов, 2006), II международной научной конференции «Современные наукоемкие технологии» (Испания, о. Тенерифе, 2006).
Публикации
Основные результаты работы изложены в 33 публикациях, в том числе в монографии «Активация свободнорадикального окисления – эфферентное звено типовых патологических процессов» (Саратов, 2006), в учебном пособии для врачей «Свободнорадикальные процессы и воспаление (патогенетические, клинические и терапевтические аспекты)» (Москва, 2007) и в журнале, рекомендованном ВАК: «Вестник Санкт-Петербургской медицинской академии им. И.И. Мечникова».
Объем и структура диссертации
Работа изложена на 243 страницах и состоит из введения, 4 глав собственных исследований, заключения, выводов, практических рекомендаций, библиографического указателя, включающего 430 наименований, из которых 246 отечественных и 184 иностранных авторов. Диссертация иллюстрирована 26 таблицами и 19 рисунками.
СОДЕРЖАНИЕ РАБОТЫ
Материалы и методы исследования
Эксперименты проведены с использованием различных контрольных групп сравнения, а также моделей системной и локальной гипоксии. Всего в работе использовано 870 белых мышей массой 18-20г и 450 белых крыс массой 180-200г.
В соответствии с целью и задачами исследования изучены состояние процессов липопероксидации, антирадикальной защиты клеток крови, гомогенатов миокарда, головного мозга, а также их энергетического обеспечения при экзогенной острой системной гипоксической гипоксии, системной циркуляторной гипоксии, возникающей при эндотоксиновом шоке, а также циркуляторной гипоксии миокарда и структур головного мозга при локальном ограничении кровотока.
В указанных вариантах моделирования гипоксических состояний представлялось целесообразным установление общих закономерностей и особенностей при гипоксии различного генеза на животных различной видовой принадлежности.
Моделирование экзогенной гипоксической гипоксии на белых мышах достигалось помещением животных массой 18-20г в герметически закрытый сосуд объемом 250 мл при постоянной температуре окружающей среды.
Системная циркуляторная гипоксия развивалась при моделировании эндотоксинового шока, достигаемого внутривенным введением холерного липополисахарида (ЛПС) белым мышам в летальных дозах, соответствующих 4 LD50. Эндотоксин получен из РосНИПЧИ «Микроб» г. Саратова.
В модификации экспериментов на белых крысах произведено моделирование ишемии миокарда в условиях острого опыта по методу H. Selyе, в процессе которого производилась окклюзия нисходящей ветви левой коронарной артерии на уровне нижнего края ушка.
Следующий вариант моделирования гипоксии выполнен с использованием экспериментальной ишемии и реперфузии структур головного мозга в острых опытах на белых крысах. Локальная ишемия достигалась за счет ограничения мозгового кровотока при кратковременном наложении зажимов на общие сонные артерии.
О состоянии процессов липопероксидации при различных видах гипоксии судили по содержанию в крови и тканях промежуточных и конечных продуктов липопероксидации – МДА (Суплонов С.Н., Баркова Э.Н., 1985) и ДК (Стальная И.Д., 1977), определяемых спектрофотометрическими методами исследования.
Интегративными показателями состояния активности антиоксидантной системы крови и тканей, а также и антирадикальной защиты клеток явились перекисная резистентность эритроцитов(Cogan G.,Gyorgy P.,Rose C.F.,1952, в модификации Покровского А.А., Абрамова А.А., 1964), уровень витамина Е (Габриэлян Н.И., Левицкий Э.Г., Щербакова О.И., 1983) и общих сульфгидрильных групп (Фоломеев В.Ф., 1981), уровень восстановленного глутатиона, а также активность СОД (Frid R.,1975) и каталазы (Conen J., Dembuc D., Markec J.,1970). Для оценки степени аутоинтоксикации и развития синдрома цитолиза использовали показатели содержания в крови МСМ (Габриэлян Н.И., 1983) и активности трансаминазы – АсАТ с помощью тест-наборов Био-Ла-Тест чешской фирмы «Лахема».
Интенсификация процессов липопероксидации в миокарде составлялась с энергообеспечением миокардиоцитов, которое оценивали по содержанию в миокарде АТФ (Acatuna B.C.,1969, Dennemann H.Z.,1961), КФ, а также по активности ряда ферментов – сукцинатдегидрогеназы (СДГ) (Кривченкова Р.С., 1971), лактатдегидрогеназы (ЛДГ) и аспартатаминотрансферазы (АсАТ), определяемых с помощью тест-наборов Био-Ла-Тест чешской фирмы «Лахема».
Выражаем искреннюю благодарность директору НТФФ «Полисан», д.б.н. А.Л. Коваленко, д.м.н., заместителю директора по науки, профессору М.Г. Романцову за предоставленную возможность освоения методов экспериментального моделирования ишемии миокарда и ишемии головного мозга, а также за выполнение ряда экспериментальных исследований на научно-экспериментальной базе фирмы «Полисан», Санкт-Петербург.
Показателями энергетического обеспечения мозга, в частности, за счет гликолитических реакций, были уровень пирувата (Gloster J., Harris P., 1962), лактата (Friedland J.M., Dietrich L.S., 1961), а также активности ЛДГ. Одновременно исследована активность СДГ – ключевого фермента цикла Кребса.
Процессы энергетического обеспечения ишемизированного мозга, а также в условиях его реперфузии сопоставлялись с состоянием липопероксидации и антирадикальной защиты клеток.
Важнейшим направлением работы явилось патогенетическое обоснование возможностей медикаментозной коррекции метаболических сдвигов при различных видах системной и локальной гипоксии.
В целях медикаментозной коррекции метаболических сдвигов при экспериментальной гипоксической гипоксии за 10 мин до эксперимента использовали однократное внутрибрюшинное введение следующих фармакологических препаратов со свойствами антиоксидантов и антигипоксантов: оксибутирата натрия (в дозе 500 мг/кг) (Леоненков В.В. и соавт., 1994), цитофлавина (в дозе 1,5 мл/кг) (Скоромец А.А., Никитина В.В., Голиков К.В., 2003; Федин А.И. и соавт., 2005), реамберина (в дозе10 мг/кг) (Суслина З.А. и соавт., 2002). Коррекция метаболических расстройств при системной циркуляторной гипоксии достигалось при использовании цитофлавина в той же суточной дозе.
В целях медикаментозной коррекции локальных и системных метаболических сдвигов при ишемическом повреждении миокарда использовали препараты: цитофлавин (внутрибрюшинно в дозе 1,5 мл/кг) и неотон (в суточной дозе 150 мг/кг) (Галяутдинов Г.С. и соавт., 1990; Долгих В.Т., Захаров И.В., Иванов С.Р., 1999; Захаров И.В. и соавт., 2002).
Медикаментозная коррекция метаболических сдвигов при ишемии мозга выполнялась с использованием цитофлавина (внутрибрюшинно в дозе 1,5 мл/кг) и пирацетама (дозе 1,5 мл/кг 20% раствора) (Клейменова И.С., 2004; Котов С.В., Исакова Е.В., 2005).
Результаты исследований были обработаны на ЭВМ типа IBM-PC с помощью программной системы Statistica for Windows (версия 5.5, г. Москва, 1999) и «Microsoft Excel, 97 SR-1» (Microsoft, 1997).
Результаты исследований и их обсуждение
Результаты исследования метаболических сдвигов при острой гипоксической гипоксии позволили выявить системную и локальную (в структурах головного мозга) активацию процессов липопероксидации, о чем свидетельствовало возрастание уровня ГПЛ (р
Библиографическая ссылка
Бизенкова М.Н. ОБЩИЕ ЗАКОНОМЕРНОСТИ МЕТАБОЛИЧЕСКИХ РАССТРОЙСТВ ПРИ ГИПОКСИИ РАЗЛИЧНОГО ГЕНЕЗА И ПАТОГЕНЕТИЧЕСКОЕ ОБОСНОВАНИЕ ПРИНЦИПОВ ИХ МЕДИКАМЕНТОЗНОЙ КОРРЕКЦИИ // НАУЧНАЯ КОНФЕРЕНЦИЯ МОЛОДЫХ УЧЕНЫХ И СТУДЕНТОВ ПО БИОЛОГИИ.
URL: http://econf.rae.ru/article/4437 (дата обращения: 21.11.2024).
Прочитать публикацию в формате PDF