Методика импрегнации нервных клеток и кровеносных сосудов в эмбриональной ткани
А.Г.Цыбулькин, Т.В.Горская, Е.А.Макеева
Кафедра анатомии человека Московского государственного медико-стоматологического университета
Для одновременного изучения кровеносных сосудов и нервов в веществе головного мозга И.В. Рясковой (1984) был модифицирован метод O.Schultze (1918), предназначенный для выявления нейрофибрилл, осевых цилиндров, ганглиозных клеток и нервных окончаний. Однако при работе с эмбриональными тканями по этой методике нами не были получены должные результаты, в связи с чем мы внесли некоторые изменения в методику импрегнации.
Кусочки эмбриональной ткани размером до 2х2х3 см фиксируют в 10% растворе нейтрального формалина не менее 10 суток.
На замораживающем микротоме готовят срезы толщиной 50-100 мкм.
Срезы промывают в дистиллированной воде в течении 24 ч и подвергают воздействию 0,8% раствора молочной кислоты длительностью 18 ч.
Материал промывают в дистиллированной воде в течении 1 часа.
Затем 15 мин материал находится в 40% спирте и 15 мин в 70% спирте при комнатной температуре.
После быстрого споласкивания дистиллированной водой срезы погружают в 10% раствор азотнокислого серебра на 1 час при температуре 30 С в темноте.
Для восстановления серебра использовали формолгидрохиноновую смесь, предложенную Рясковой: гидрохинон - 2,5 г, формалин - 5 мл, дистиллированная вода до 100 мл. Восстанавливающая смесь перед работой разводилась в 10 раз. Срезы находились в растворе до появления коричневой окраски
После тщательной промывки в дистиллированной воде срезы помещались в раствор хлорного золота на 1-2 мин до появления серого цвета (на 10 мл дистиллированной воды добавляли 5 кап. 1% р-ра хлорного золота).
После быстрого споласкивания срезы на 1-2 мин. помещали в 5% раствор гипосульфита натрия.
Материал тщательно промывают и заключают в бальзам по общепринятой методике.
В нервных клетках ядра темно-коричневые, цитоплазма желтая и отростки нейронов темно-коричневые. Стенки артерий темно-коричневые с хорошо различаемой структурой, капилляры – желтые, хорошо выражены перициты. Глия выявляется с темно-коричневыми ядрами, коричневыми отростками и светлой цитоплазмой
Литература:
1.Ромейс Б. Микроскопическая техника. М., 1954, с 429-431.
2.Ряскова И.В. Методика импрегнации нервных клеток и кровеносных сосудов в веществе головного мозга. АрхивАГЭ., 1984, Ленинград, с.97-99
3.Schultze O. (1918) цит. По Б.Ромейсу,1954
Библиографическая ссылка
Цыбулькин А.Г., Горская Т.В., Макеева Е.А. Методика импрегнации нервных клеток и кровеносных сосудов в эмбриональной ткани
// Научный электронный архив.
URL: http://econf.rae.ru/article/4476 (дата обращения: 03.04.2025).
Прочитать публикацию в формате PDF