к.б.н., ассистент кафедры биохимии и лабораторной медицины с курсом клинической лабораторной диагностики ПДО
Омской государственной медицинской академии
ГОНАДОПРОТЕКТОРНЫЙ ЭФФЕКТ СЕЛЕНИТА НАТРИЯ
В УСЛОВИЯХ ПЕРЕТРЕНИРОКВИ
(экспериментальное исследование)
Ранее нами было установлено, что торможение эндокринной функции семенников при чрезмерных физических нагрузках (ЧФН) связано с развитием в них острого нарушения метаболизма пуринов (ОНМП) [2, 5]. Суть его заключается в том, что гипоксия, вызванная ЧФН, сопутствующие ей лакто- и кетоацидоз, приводят к усилению катаболизма пуриновых мононуклеотидов до мочевой кислоты [7, 8]. Этот процесс сопряжен с выработкой ксантиноксидазой активированных кислородных метаболитов, повреждающих ненасыщенные жирные кислоты мембранных структур клеток Лейдига. Эти метаболические изменения являются звеньями единого биохимического процесса [5–7]. В его развитии важную роль играет недостаточно эффективная инактивация перекисных соединений глутатионпероксидазой (ГПО) [6]. Поскольку она содержит в своем активном центре ион селена, то недостаточное обеспечение организма этим микроэлементом может привести к торможению активности ГПО.
Цель данной работы – изучение возможного гонадопротекторного эффекта селенита натрия у экспериментальных животных в условиях перетренировки.
Материал и методы исследования.
Эксперимент проводили в Центральной научно-исследовательской лаборатории Омской государственной медицинской академии на 30 крысах-самцах массой 240±20 г. Влияние физических нагрузок на крыс изучалось на модели вынужденного плавания их с грузом [5–8]. Было сформировано три группы: 1-я – контрольная (К); 2-я – которой моделировали чрезмерные режимом физические нагрузки (ЧФН); 3-я – получавшая селенит натрия на фоне ЧФН (ЧФН+С). Селенит натрия вводили перорально в дозе 30 мкг/кг до плавания ежедневно в течение последней недели эксперимента. При проведении исследований соблюдались требования Европейской конвенции по защите экспериментальных животных.
После завершения эксперимента крыс декапитировали. В крови исследовали уровень глюкозы и молочной кислоты, а в ее плазме определяли концентрацию β-оксимасляной и мочевой кислот унифицированными методами исследования. Кроме того, в плазме крови определяли концентрацию общего тестостерона иммуноферментным методом исследования. Из семенников готовили 10% гомогенаты на 0,15М растворе KCl. В гомогенатах определяли содержание белка биуретовым методом, мочевой кислоты, глутатиона (GSH) [3], малонового диальдегида (МДА) [4], тестостерона – иммуноферментным методом с использованием наборов реактивов фирмы «Diagnostic Systems Laboratories, Inc.» (Канада) и комплекта оборудования фирмы «BIO-RAD Laboratories» (Япония). Активность ГПО (КФ 1.11.1.9) определяли по [1].
Статистическую обработку полученных данных проводили с использованием критериев Стьюдента и Манна-Уитни при помощи программы Statistica 6.0. (StatSoft Inc., США).
Результаты исследования.
Из представленных в табл. 1 данных видно, что в организме крыс подвергшихся ЧФН усилены явления гипоксии, о чем свидетельствует развитие лакто- и кетоацидоза. Последние способны активировать АМФ-дезаминазу и аденозиндезаминазу, ферменты, участвующие в окислении пуриновых мононуклеотидов до урата. Это ведет к развитию в семенниках ОНМП, тормозящему функцию клеток Лейдига [6].
Таблица 1
Биохимические показатели крови подопытных крыс, (M±m;n=10)
Показатель
Группа
К
ЧФН
ЧФН+С
в цельной крови:
Глюкоза, ммоль/л
7,36 ± 0,31
6,34 ± 0,29
к*
8,66 ± 0,24
ч***
Лактат, ммоль/л
6,53 ± 0,21
10,8 ± 0,43
к***
7,48 ± 0,55
ч***
в плазме крови:
β-оксибутират,мкмоль/л
86 ± 9
139 ± 17
к*
120 ± 11
Мочевая кислота, мкмоль/л
80,1 ± 5,3
131 ± 5,9
к***
108 ± 6,5
ч*
Общий тестостерон,
нмоль/л
13,8 ± 2,1
7,6 ± 2,1
к*
13,6 ± 1,8
ч*
Примечание. (здесь и в табл. 2): к – различия статистически значимы с контролем, ч – с крысами, перенесшими чрезмерные физические нагрузки; * – различия значимы с вероятностью * – p< 0,05, ** – p< 0,01, *** – p< 0,001.
Введение крысам, подвергшимся ЧФН, селенита натрия позволяет уменьшить явления гипоксии. Можно полагать, что этот микроэлемент уменьшает степень повреждения гепатоцитов, способствуя, таким образом, более эффективной реутилизации ими лактата и поддержанию уровня гликемии. Вследствие этого снижается степень ацидоза тканей и сопутствующего ему ОНМП. Это выражается в более низком, чем у животных группы ЧФН, содержании урата в крови и семенниках (на 18% в обоих случаях) (табл. 1, 2).
Таблица 2
Биохимические показатели семенников
подопытных крыс, (M±m;n=10)
Показатель
Группа
К
ЧФН
ЧФН+С
Мочевая кислота,
нмоль/мг белка
143 ± 11
194 ± 10
к**
160 ± 12
ч*
Глутатион,
нмоль/мг белка
20,1 ± 1,4
11,7 ± 1,8
к**
18,1 ± 2,1
ч*
Глутатионпероксидаза, МЕ/мг белка
337 ± 24
181 ± 21
к***
302 ± 34
ч**
Малоновый диальдегид, нмоль/мг белка
10,2 ± 0,9
17,6 ± 1,2
к***
14,1 ± 1,0
ч*
Тестостерон,
пмоль/мг белка
14,2 ± 3,1
6,4 ± 1,1
к*
16,9 ± 3,3
ч**
Благодаря снижению генерации ксантиноксидазой активированных кислородных метаболитов, в меньшей степени подвергаются перекисному окислению мембранные структуры семенников. Об этом свидетельствует более низкое, чем у крыс группы ЧФН, содержание МДА в семенниках животных группы ЧФН+С. При этом снижается повреждающее воздействие перекисных соединений на ГПО и активность ее в семенниках крыс второй из названных групп выше на 67%. Кроме того, уменьшение продукции перекисных соединений снижает расход GSH на их инактивацию, предотвращая развитие его дефицита. Содержание этого трипептида в семенниках крыс группы ЧФН+С выше, чем у животных группы ЧФН, на 55%. Это способствует не только лучшей сохранности клеток Лейдига, но и более эффективной генерации ими тестостерона. Содержание последнего в гомогенатах семенников крыс группы ЧФН+С выше, чем у животных группы ЧФН на 164% (табл. 2). Концентрация общего тестостерона в плазме крови крыс группы ЧФН+С также была выше, чем у животных группы ЧФН на 79% (табл. 1).
Таким образом, пероральное введение селенита натрия крысам, подвергшимся чрезмерным физическим нагрузкам, уменьшает степень гипоксии, предотвращая, таким образом, развитие в семенниках острого нарушения метаболизма пуринов, сопряженное с повреждением клеток Лейдига и снижением ими инкреции тестостерона, что указывает на гонадопротекторный эффект изучаемого вещества.
Библиографический список:
Власова С.Н., Шабунина Е.И., Переслегина И.А. Активность глутатионзависимых ферментов эритроцитов при хронических заболеваниях печени у детей // Лаб. дело. 1990. № 8. С. 19–21.
Конвай В.Д., Рейс Б.А., Чигринский Е.А. Роль дефицита рибозы для метаболизма семенников крыс в условиях перетренировки // Бюл. экспер. биол. мед. 2010. Т. 150, № 11. С. 582–585.
Костромитиков Н.А., Суменков Е.А. Определение глутатиона фотоколориметрическим методом исследования // Вестн. РАСХН. 2005. № 5. С. 69–70.
Селютина С.Н., Селютин А.Ю., Паль А.И. Модификация определения концентрации ТБК-активных продуктов сыворотки крови // Клин. лаб. диагн. 2000. № 2. С. 8–10.
Чигринский Е.А., Конвай В.Д. // Естеств. и техн. науки. 2009. № 3. С. 69–74.
Чигринский Е.А. Антиоксидантная система семенников крыс при физических нагрузках разной интенсивности: дис. … канд. биол. наук. Омск, 2010. 150 с.
Чигринский Е.А. О возможных пусковых механизмах апоптоза в семенниках при чрезмерных физических нагрузках // Мед. науки. 2010. № 2. С. 46–48.
Чигринский Е.А., Конвай В.Д., Рейс Б.А. Нарушение функции семенников крыс при чрезмерных физических нагрузках: молекулярные механизмы, коррекция // Вопр. биол. мед. фарм. химии. 2011. № 1. С. 22–27.
Библиографическая ссылка
Чигринский Е.А. Гонадопротекторный эффект селенита натрия в условиях перетренировки (экспериментальное исследование) // Научный электронный архив.
URL: http://econf.rae.ru/article/5948 (дата обращения: 01.09.2024).